Амидаза (AMD)
Ензими:Се макромолекуларни биолошки катализатори, повеќето ензими се протеини
Амидаза:Катализирајте ја хидролизата на различни ендогени и туѓи алифатични и ароматични амиди со пренесување на ацилна група во вода со производство на слободни киселини и амонијак.Хидроксамичните киселини и другите органски киселини се широко користени како лекови, бидејќи тие се состојки на факторите на раст, антибиотиците и инхибиторите на туморот.Амидазите може да се поделат на ацилази од тип R и S тип според стереоселективноста на катализаторот.
Покрај катализирањето на хидролизата на амидите, амидазата може да катализира и реакции на ацил трансфер во присуство на ко-супстрати како што е хидроксиламин.
Амидазата со различни извори има различна специфичност на супстратот, некои од нив можат само да хидролизираат ароматични амиди, некои од нив можат само да хидролизираат алифатични амиди, а некои да хидролизираат α-или ω-амино амиди.Повеќето од амините имаат добра каталитичка активност само за ациклични или едноставни ароматични амиди, но за сложените ароматици, хетероцикличните амиди, особено амидите со орто супституенти, се генерално ниски во активност (само неколку ензими покажуваат подобри каталитички ефекти).
Каталитички механизам:
| Ензими | Код на производот | Код на производот |
| Ензимски прав | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | сет од 19 амидази, 50 mg секоја 19 ставки * 50 mg / ставка, или друга количина |
| Комплет за скрининг (SynKit) | ES-AMD-1900 | збир од 19 амидази, 1 mg секој 19 ставки * 1 mg / ставка |
★ Висока специфичност на подлогата.
★ Силна хирална селективност.
★ Висока ефикасност на конверзија.
★ Помалку нуспроизводи.
★ Благи услови за реакција.
★ Еколошки.
➢ Треба да се спроведе ензимски скрининг за специфични супстрати поради специфичноста на подлогата и да се добие ензим кој го катализира целниот супстрат со најдобар каталитички ефект.
➢ Никогаш не контактирајте со екстремни услови како што се: висока температура, висока/ниска pH вредност и органски растворувач со висока концентрација.
➢ Нормално, системот за реакција треба да вклучува супстрат, пуфер раствор (Оптималната pH на реакцијата на ензимот).Ко-супстратите како што е хидроксиламин треба да бидат присутни во системот за реакција на ацил трансфер.
➢ AMD треба да се додаде последно во системот за реакција со оптимална pH и температура на реакцијата.
➢ Сите видови на AMD имаат различни услови за оптимална реакција, така што секој од нив треба дополнително да се проучува поединечно.
Пример 1(1):
Активност на хидролиза на различни амидни супстрати
| Подлога | Специфична активност μmols мин-1mg-1 | Подлога | Специфична активност μmols мин-1mg-1 |
| Ацетамид | 3.8 | ο-ОХ бензамид | 1.4 |
| Пропионамид | 3.9 | p-ОХ бензамид | 1.2 |
| Лактамид | 12.8 | ο-НХ2бензамид | 1.0 |
| Бутирамид | 11.9 | p-НХ2бензамид | 0,8 |
| Изобутирамид | 26.2 | ο- Толуамид | 0.3 |
| Пентанамид | 22.0 | p- Толуамид | 8.1 |
| Хексанамид | 6.4 | Никотинамид | 1.7 |
| Циклохексанамид | 19.5 | Изоникотинамид | 1.8 |
| Акриламид | 10.2 | Пиколинамид | 2.1 |
| Метакриламид | 3.5 | 3-фенилпропионамид | 7.6 |
| Пролинамид | 3.4 | Индол-3-ацетамид | 1.9 |
| Бензамид | 6.8 |
Реакцијата беше спроведена во 50 mM пуфер раствор на натриум фосфат, pH 7,5, на 70 ℃.
| Амиди | Хидроксиламин | Хидразин |
| Ацетамид | 8.4 | 1.4 |
| Пропионамид | 18.4 | 3.0 |
| Изобутирамид | 25.0 | 22.7 |
| Бензамид | 9.2 | 6.1 |
Реакцијата беше спроведена во 50 mM пуфер раствор на натриум фосфат, pH 7,5, на 70 ℃.
Поврзана концентрација на реагенс: амиди, 100 mM (бензамид, 10 mM);хидроксиламин и хидразин, 400 mM;ензим 0,9 μM.
Пример 2(2):
Пример 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Екстремофили, 2001, 5:183-192.
2. Гуо ФМ, Ву ЈП, Јанг ЛР и др.Процесна биохемија, 2015 година, 50 (8): 1400-1404.
3. Женг РЦ, Џин Џеј Кју, Ву ЗМ и др.Биоорганска хемија, 2017 година, достапна на интернет 7.
