Амидаза (AMD)
Ензими:Се макромолекуларни биолошки катализатори, повеќето ензими се протеини
Амидаза:Катализирајте ја хидролизата на разни ендогени и туѓи алифатични и ароматични амиди со пренесување на ацилна група во вода со производство на слободни киселини и амонијак. Хидроксаминските киселини и другите органски киселини се широко користени како лекови бидејќи се составни делови на фактори на раст, антибиотици и инхибитори на тумори. Амидазите можат да се поделат на ацилази од R-тип и S-тип според стереоселективноста на катализаторот.
Покрај катализирањето на хидролизата на амидите, амидазата може да катализира и реакции на ацил трансфер во присуство на ко-супстрати како што е хидроксиламин.
Амидазите со различни извори имаат различна специфичност на супстратот, некои од нив можат да хидролизираат само ароматични амиди, некои од нив можат да хидролизираат само алифатични амиди, а некои хидролизираат α- или ω-амино амиди. Повеќето амини имаат добра каталитичка активност само за ациклични или едноставни ароматични амиди, но за комплексните ароматични соединенија, хетероцикличните амиди, особено амидите со орто супституенти, генерално имаат ниска активност (само неколку ензими покажуваат подобри каталитички ефекти).
Каталитички механизам:
| Ензими | Код на производ | Код на производ |
| Ензимски прав | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | сет од 19 амидази, по 50 мг секоја 19 парчиња * 50 мг / парче, или друга количина |
| Комплет за скрининг (SynKit) | ES-AMD-1900 | сет од 19 амидази, по 1 мг секоја 19 парчиња * 1 мг / парче |
★ Висока специфичност на супстратот.
★ Силна хирална селективност.
★ Висока ефикасност на конверзија.
★ Помалку нуспроизводи.
★ Услови на блага реакција.
★ Еколошки.
➢ Ензимско скрининг треба да се спроведе за специфични супстрати поради специфичноста на супстратот, и да се добие ензим кој ја катализира целната супстрат со најдобар каталитички ефект.
➢ Никогаш не допирајте со екстремни услови како што се: висока температура, висока/ниска pH вредност и органски растворувач со висока концентрација.
➢ Нормално, реакцискиот систем треба да вклучува супстрат, пуферски раствор (оптимална pH вредност на реакцијата на ензимот). Ко-супстрати како што е хидроксиламин треба да бидат присутни во реакцискиот систем на ацил трансфер.
➢ AMD треба да се додаде последен во реакцискиот систем со оптимална pH вредност и температура на реакцијата.
➢ Сите видови на AMD имаат различни оптимални услови на реакција, па затоа секој од нив треба дополнително да се изучува поединечно.
Пример 1(1):
Хидролизна активност на различни амидни супстрати
| Подлога | Специфична активност μмолови мин-1mg-1 | Подлога | Специфична активност μмолови мин-1mg-1 |
| Ацетамид | 3.8 | ο-OH бензамид | 1.4 |
| Пропионамид | 3.9 | p-OH бензамид | 1.2 |
| Лактамид | 12,8 | ο-НХ2бензамид | 1.0 |
| Бутирамид | 11.9 | p-НХ2бензамид | 0,8 |
| Изобутирамид | 26.2 | ο-Толуамид | 0,3 |
| Пентанамид | 22,0 | p-Толуамид | 8.1 |
| Хексанамид | 6.4 | Никотинамид | 1.7 |
| Циклохексанамид | 19,5 | Изоникотинамид | 1,8 |
| Акриламидот | 10.2 | Пиколинамид | 2.1 |
| Метакриламид | 3,5 | 3-фенилпропионамид | 7.6 |
| Пролинамид | 3.4 | Индол-3-ацетамид | 1.9 |
| Бензамид | 6,8 |
Реакцијата беше спроведена во 50 mM раствор на натриум фосфат, pH 7,5, на 70 ℃.
| Амиди | Хидроксиламин | Хидразин |
| Ацетамид | 8.4 | 1.4 |
| Пропионамид | 18,4 | 3.0 |
| Изобутирамид | 25,0 | 22,7 |
| Бензамид | 9.2 | 6.1 |
Реакцијата беше спроведена во 50 mM раствор на натриум фосфат, pH 7,5, на 70 ℃.
Поврзана концентрација на реагенс: амиди, 100 mM (бензамид, 10 mM); хидроксиламин и хидразин, 400 mM; ензим 0,9 μM.
Пример 2(2):
Пример 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Екстремофили, 2001, 5:183-192.
2. Гуо ФМ, Ву ЈП, Јанг ЛР, и др. Процесна биохемија, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Женг Р.Ц., Џин Ј.К., Ву З.М. и др. Биоорганска хемија, 2017, Достапно онлајн 7.
